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ESF 921™昆虫细胞培养基

产品简介

ESF 921™昆虫细胞培养基是一种完整的无血清、无蛋白的培养基,用于稳定的细胞生长、蛋白表达和杆状病毒载体的生产,用于昆
虫细胞,包括Sf9、Sf21、Tni和果蝇S2。仅供研究使用,不适用于诊断程序。

产品型号:96-001-01
更新时间:2024-04-19
厂商性质:代理商
访问量:1518

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产品描述 

ESF 921昆虫细胞培养基是一种完整的无血清、无蛋白的培养基,用于稳定的细胞生长、蛋白表达和杆状病毒载体的生产,用于昆 虫细胞,包括Sf9、Sf21、Tni和果蝇S2。仅供研究使用,不适用于诊断程序。

产品信息

ESF921是一个1倍完整的不用稀释、即用的培养基。无需添加谷AN酰胺或表面活性剂,如泊洛沙姆188;不推荐使用KANG生素,然而, 必要时,可以使用QING霉素-LIAN霉素(双抗)或庆DA霉素(三抗)。

安全信息

 请阅读安全数据表(SDS),并遵循操作说明;佩戴适当的防护眼镜、衣服和手套。

培养

培养基: ESF 921

细胞系(s):Sf9、Sf21、Tni、S2 

培养类型:悬浮培养和贴壁培养 

推荐培养容器:摇瓶或转瓶 

温度范围:27°C至28°C 

培养箱:干燥,无二氧化碳环境。确保适当的气体交换,尽量减少培养物暴露在光线下。

细胞对于ESF 921培养基的使用驯化

细胞适应ESF 921培养基时,建议使用梯度适应。在开始适应过程之前,细胞存活率至少要达到95% (Sf9)、93% (Tni)、90%  (Sf21)或85% (S2),并且生长速度处于细胞分裂对数生长期。 

1.将细胞传代至esf921与原始培养基的比例为50:50。在适应过程中,按照1 × 个细胞/ mL的原始播种密度接种。 

2.在干燥、无二氧化碳培养箱中以27°C培养,在轨道摇床平台上以120-140 rpm旋转摇瓶培养物。松开盖子,允许气体交换。

3.当活细胞数量为4-6 × 个/ mL时传代(分裂后3-4天),按照75:25的比例放入ESF 921原始培养基中。

4.重复上一步,增加ESF 921与原始培养基的比例(75:25,然后是88:12,95:5),直到使用100% ESF 921。可能需要在一 种比例的情况下传代多次。

5.昆虫细胞在适应过程中可能会膨胀。膨胀2-3微米是正常现象,5微米以上是细胞应激培养的提醒,应该用一批新的细胞重新开始 适应。 在100% ESF 921中传代几次后,活细胞计数应符合上表,存活率>90%。

低温冷藏 

1.冻存培养基为无菌过滤的90% ESF 921+10%DMSO。可添加0.15 M的海藻糖,在4°C进行存储和使用。 

2.准备所需数量的细胞,在对数生长期,活力>90%。

3.确定活细胞的密度,并计算所需的冷冻介质的体积,保证最终的细胞密度在25-50x106细胞/mL。

4.1000 rpm离心5分钟,收获细胞,将细胞重悬于预定体积的4°C冷冻培养基中。

5.按照1mL等分悬浮液放入冷冻瓶中。

6.按照标准程序(每分钟降低1°C)在自动或手动控制速率的冷冻设备中实现低温保存。

7.将冷冻细胞转移到液氮中,建议在-200°C至-125°C的气相储存。


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